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hot news1.實(shí)驗目的:
通過(guò)細胞的體外培養來(lái)檢測產(chǎn)品的生物性能是否達到要求。
2.實(shí)驗原理:
體外培養的細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養枯竭,將培養的細胞分散,從容器中取出,以1:2或l:3以上的比率轉移到另外的容器中進(jìn)行培養,即為傳代培養。通過(guò)貼壁細胞的傳代培養,觀(guān)察細胞的生長(cháng)狀態(tài)可以反映出培養產(chǎn)品是否達到細胞培養的要求。
3.實(shí)驗材料:
3.1 抽檢樣品:
3.2 細胞株:VERO細胞系:*貼壁細胞,主要用于接種病毒的一種細胞。
3.3 實(shí)驗試劑:RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶(876536)、小牛血清(8187648)、都購自廣州英韋創(chuàng )津生物試劑公司。
3.4 實(shí)驗耗材:3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。
3.5 實(shí)驗儀器:XDS-1倒置顯微鏡購自廣州粵顯光學(xué)儀器科技有限公司;
超凈工作臺購自蘇州凈化儀器設備公司;
4.實(shí)驗步驟:
4.1. 在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)和密度,取生長(cháng)良好的細胞若干瓶,棄掉舊培養液。
4.2. 加入胰酶消化細胞,消化適度后倒去胰酶。
4.3. 加入適量培養液反復吹打數次。
4.4. 細胞計數稀釋細胞密度為1×105/ml
4.5. 將細胞接種于抽檢樣品中:
5.實(shí)驗結果:
1、Vero細胞培養24小時(shí)后10×10倍下圖片
2、Vero細胞培養48小時(shí)后10×10倍下圖片
3、細胞計數
6.結果判定
這次抽檢樣品做細胞培養檢測,細胞生長(cháng)狀態(tài)正常,貼壁生長(cháng)良好,10%血清培養液培養,細胞增長(cháng)率符合企業(yè)標準。
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